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新・医学と切手の極意
鉄人レター
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2009/２/９(No.11)
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■■ ウエスタンブロット法について ■■
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今回は、HIV確認検査のウエスタンブロット法について解説します。
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□ウエスタンブロット法とは何?
↓
ウエスタンブロット法(Westtan Blot:WB法)とは、ニトロセルローズ膜が、DNA、RNA
蛋白質を非特異的に吸着する性質を利用し、電気泳動によって分離した蛋白質をニトロ
セルローズ膜に転写し、任意の蛋白質に対する抗体でその蛋白質の存在を検出する検査
法です。
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□ウエスタンブロット法は何を検査するのか?
この検査は、色々のウイルスの分子量の解析や抗体の検査に使われます。
HIVの抗体検査が陽性の場合、本当にHIVに感染して、HIV蛋白に対する抗体が血液中に
存在するかの確認検査として用いられます。
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□この検査で陽性となったときは?
真にHIVに感染していると判断します。
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□ウエスタンブロット法は何を見つけるのか?
HIVの抗原蛋白質に対する蛋白抗体を検出します。
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□どのようなHIV抗原の蛋白抗体を見つけるのか?
１．gag遺伝子・・・・・HIVの各蛋白をコードしている遺伝子。
p55,P17,P24
２．pol遺伝子・・・・・逆転写酵素をコードしている遺伝子
p66,p55
３．env遺伝子・・・・・外被蛋白をコードしている遺伝子
gp160,gp120,gp41
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□どのように判定するのか?
ニトログリセロール膜上に展開する陽性反応の蛋白質バンドは、ストリップを水平に
横切る暗紫色の遷都して認められる。
分子量の小さい蛋白質は、ストリップの下部に出現し、分子量の高い蛋白質は、上部
に出現する。
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□検査判定上の注意は?
ストリップに出現するバンドの色の濃さは、強弱があることから、色々のバンドの
発色パターンを示すことがあります。
検査になれていない者が、判定をするとバンドの位置を読み違えたり、弱い発色バンドを
見落とすことになります。
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□ウエスタンブロット検査はどこの医療機関で受けられるのか?
この検査は非常に複雑で、高度の技術を必要とすることから、大学病院・大病院・
研究所以外しか自施設では実施していません。
自施設で実施していないときは、検査専門の会社に検査を依頼しますので、どこの
医療機関でも受けることは可能です。
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□検査結果が出るまでどのくらいかかるの?
ほとんどの施設が検査専門の会社に検査を依頼しますので、結果が分かるまでには、
７〜10日前後かかります。
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□ウエスタンブロット法の反対基準は?
１．バンドが全く認められない・・・・・・・・・・・・・・・・陰性
２．それぞれの遺伝子蛋白に対するバンドが出現・・・・・・・・陽性
３．その他、バラバラにバンドが出現・・・・・・・・・・・・・再検査
【注意】この判定基準は、今後の研究によるHIVに対する新しい知見が見つかれば
当然変更される可能性があります。
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□偽陽性反応の出現は?
特異性(真の陽性を見逃さず、ニセの陽性反応を排除する)が高く信頼されている検査
ですが、まれに偽陽性反応が認められますが、出現頻度は非常に低いです。
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□偽陰性反応の出現は?
特異性(真の陽性を見逃さず、ニセの陽性反応を排除する)は非常に高い検査ですが、
感度(陽性を全て見つけ出す)が非常に低いことから、HIV抗体検査や抗原抗体検査が
陽性となっても、ウエスタンブロット法は、陰性の場合があります。
そのことから、現在は、ウエスタンブロット法と同時に、リアルタイムPCR検査を
行い、ウエスタンブロット法の偽陰性反応を防止しています。
【参考資料】→https://voxsangman.com/chishiki/hiv37.html
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※まとめ※
HIV確認試験のウエスタンブロット法について解説してみました。
お役に立ちましたでしょうか??!!
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◆編集後記◆
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最後までお読み頂き、ありがとうございました。
ご理解いだけましたでしょうか。
次回発行は、来年２月23日を予定しておりますのでご期待下さい。
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