■□□□ エイズは正しい知識を身につけることで予防可能な病気です!! □□□■ ■□□□□□□□□□ 正しい知識を身につけて予防 □□□□□□□□□□□□■ 新・医学と切手の極意 鉄人レター ■□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□■ 2009/2/9(No.11) ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ ■■ ウエスタンブロット法について ■■ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 今回は、HIV確認検査のウエスタンブロット法について解説します。 ------------------------------------------------------------------------------- □ウエスタンブロット法とは何? ↓ ウエスタンブロット法(Westtan Blot:WB法)とは、ニトロセルローズ膜が、DNA、RNA 蛋白質を非特異的に吸着する性質を利用し、電気泳動によって分離した蛋白質をニトロ セルローズ膜に転写し、任意の蛋白質に対する抗体でその蛋白質の存在を検出する検査 法です。 ------------------------------------------------------------------------------- □ウエスタンブロット法は何を検査するのか? この検査は、色々のウイルスの分子量の解析や抗体の検査に使われます。 HIVの抗体検査が陽性の場合、本当にHIVに感染して、HIV蛋白に対する抗体が血液中に 存在するかの確認検査として用いられます。 ------------------------------------------------------------------------------- □この検査で陽性となったときは? 真にHIVに感染していると判断します。 ------------------------------------------------------------------------------- □ウエスタンブロット法は何を見つけるのか? HIVの抗原蛋白質に対する蛋白抗体を検出します。 ------------------------------------------------------------------------------- □どのようなHIV抗原の蛋白抗体を見つけるのか? 1.gag遺伝子・・・・・HIVの各蛋白をコードしている遺伝子。 p55,P17,P24 2.pol遺伝子・・・・・逆転写酵素をコードしている遺伝子 p66,p55 3.env遺伝子・・・・・外被蛋白をコードしている遺伝子 gp160,gp120,gp41 =============================================================================== □どのように判定するのか? ニトログリセロール膜上に展開する陽性反応の蛋白質バンドは、ストリップを水平に 横切る暗紫色の遷都して認められる。 分子量の小さい蛋白質は、ストリップの下部に出現し、分子量の高い蛋白質は、上部 に出現する。 ------------------------------------------------------------------------------- □検査判定上の注意は? ストリップに出現するバンドの色の濃さは、強弱があることから、色々のバンドの 発色パターンを示すことがあります。 検査になれていない者が、判定をするとバンドの位置を読み違えたり、弱い発色バンドを 見落とすことになります。 ------------------------------------------------------------------------------- □ウエスタンブロット検査はどこの医療機関で受けられるのか? この検査は非常に複雑で、高度の技術を必要とすることから、大学病院・大病院・ 研究所以外しか自施設では実施していません。 自施設で実施していないときは、検査専門の会社に検査を依頼しますので、どこの 医療機関でも受けることは可能です。 ------------------------------------------------------------------------------ □検査結果が出るまでどのくらいかかるの? ほとんどの施設が検査専門の会社に検査を依頼しますので、結果が分かるまでには、 7〜10日前後かかります。 ------------------------------------------------------------------------------- □ウエスタンブロット法の反対基準は? 1.バンドが全く認められない・・・・・・・・・・・・・・・・陰性 2.それぞれの遺伝子蛋白に対するバンドが出現・・・・・・・・陽性 3.その他、バラバラにバンドが出現・・・・・・・・・・・・・再検査 【注意】この判定基準は、今後の研究によるHIVに対する新しい知見が見つかれば 当然変更される可能性があります。 ------------------------------------------------------------------------------- □偽陽性反応の出現は? 特異性(真の陽性を見逃さず、ニセの陽性反応を排除する)が高く信頼されている検査 ですが、まれに偽陽性反応が認められますが、出現頻度は非常に低いです。 ------------------------------------------------------------------------------- □偽陰性反応の出現は? 特異性(真の陽性を見逃さず、ニセの陽性反応を排除する)は非常に高い検査ですが、 感度(陽性を全て見つけ出す)が非常に低いことから、HIV抗体検査や抗原抗体検査が 陽性となっても、ウエスタンブロット法は、陰性の場合があります。 そのことから、現在は、ウエスタンブロット法と同時に、リアルタイムPCR検査を 行い、ウエスタンブロット法の偽陰性反応を防止しています。 【参考資料】→https://voxsangman.com/chishiki/hiv37.html =============================================================================== ※まとめ※ HIV確認試験のウエスタンブロット法について解説してみました。 お役に立ちましたでしょうか??!! =============================================================================== ◆編集後記◆ ======================================= 最後までお読み頂き、ありがとうございました。 ご理解いだけましたでしょうか。 次回発行は、来年2月23日を予定しておりますのでご期待下さい。 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− *************************************** ★最後に次の点だけは、何卒、ご了承のうえご購読下さい★ ●このメールマガジンは、長年エイズ研究に従事しその間に有した経験と知識を 基にして、内外の学会・専門雑誌・各国の情報をも参考に出筆し、万全を期して おりますが、ご利用により、発生したいかなるトラブル・損失等に対しても、発 行者は一切責任を負いませんので、ご利用は自己責任でお願いします。 また、記事の一部又は全部の転載を禁じます ===========<新医学と切手の極意 鉄人レター>=========== 発行者 : 血液の鉄人 ウェブサイト : https://voxsangman.com/ =======================================
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